Высоко технологичные лабораторные методы диагностики дают возможность выявить множество заболеваний животных на самых ранних стадиях. Одним из таких методов является метод полимеразой цепной реакции (ПЦР). Это один из самых новых и точных способов диагностики, он широко и успешно применяется в ветеринарии.
Метод ПЦР использует принципы молекулярной биологии. Его суть заключается в применении особых ферментов, которые многократно копируют фрагменты РНК и ДНК возбудителей болезни, которые находятся в пробах биоматериала.
ПЦР- анализ состоит из нескольких этапов. Первый этап это пробаподготовка-заключается в обработке исследуемого материала. На втором этапе проводится выделение наследственного материала- ДНК или РНК – из клеток. На третьем этапе проводится амплификация, то есть умножение количества специфических участков ДНК. Для этого используются тест-системы, которые являются специфическими для каждого возбудителя. Четверней этап ПЦР- диагностики заключается в проведении электрофоретической детекции продуктов ПЦР-ампликонов. Сейчас наиболее распространенным способом проведения анализа является ПЦР в реальном времени – этот метод практически не допускает ложноположительных результатов, к тому же срок обработки образцов при исследовании таким способом сокращается. Следует отметить, что для получения достоверного результата ПЦР – анализа необходимым условием является соблюдения правил отбора, хранения и транспортировки клинического материала. Несмотря на то, что ПЦР является очень чувствительным методом, желательно наличие определенного количества возбудителя в пробе.
Для ПЦР диагностики заболеваний на анализ берут разные виды биоматериала. Выбор зависит от типа инфекции. Взятие материала следует проводить в одноразовых не талькованных перчатках (так как тальк угнетает ПЦР). Кровь берут одноразовой иглой в одноразовую пробирку без антикоагулянта. Кусочки пораженных органов от павших животных отбирают в стерильные одноразовые контейнеры, или, в чистые стеклянные или пластиковые емкости. Так же материалом для исследования может служить: моча, фекалии, слюна, мокрота, соскобы, смывы.
Следует строго соблюдать температурные режимы хранения и транспортирования отобранного материала. Транспортирование осуществляют в термоконтейнере с охлаждающими элементами или термосе со льдом. При хранении материала более суток его необходимо заморозить при Т – 200С.
С 2012 года ПЦР диагностика вирусных и бактериальных заболеваний проводится в ГБУ БО «Почепская ЗВЛ». За 2019 год в ЛДО ГБУ БО «Почепская ЗВЛ» были проведены исследования на следующие болезни: АЧС, КЧС, ИРТ, ВД, ПГ-3, Блютанг, Шмаленберг, РРСС, ПВС, Грипп птиц, Ротовирусные, Короновирусные инфекции.
На основании ПЦР анализа ветврач может точно определить заболевание и назначить эффективное лечение.