Методы диагностики болезни Шмалленберга
Отбор проб и диагностика заболевания
При проведении мониторинга и/или подозрении в заболевании материалом для исследования служат:
а) от новорождённых животных с признаками врождённых уродств, абортированных плодов и мертворожденных животных отбирают - пробы головного мозга, мекония, амниотической жидкости, плаценты, пуповины;
б) от павших и подвергнутых убою животных (желательно при ярко выраженных клинических признаках болезни), отбирают - пробы крови, пробы головного, спинного мозга, селезенка, а от самок, в том числе пробы органов воспроизводства;
в) от живых животных отбирают:
- при наличии массовых случаев диареи и снижении молочной продуктивности отбирают цельную кровь, от самцов производителей отбирают - сперму, цельную кровь;
- пробы крови для выявления генома вируса в объеме 1,5-2 см, из яремной вены с соблюдением правил асептики и антисептики в стерильные флаконы или в вакуумные пробирки с антикоагулянтом. В качестве антикоагулянта используют 0,5 М ЭДТА (Трилон Б) в количестве 1/10 от объема крови;
- пробы сывороток крови и (или) молозива. Допускается использование вакуумных пробирок без стабилизаторов (с активатором свертывания). Отстоявшуюся сыворотку отбирают стерильной пипеткой в стерильные флаконы или пробирки;
г) кровососущие членистоногие (видовой состав насекомых имеющих, потенциал для распространения вируса), в первую очередь Culicoides.
Пробы внутренних органов, тканей и жидкостей, мекония, за исключением проб стабилизированной крови, подвергаются замораживанию (не выше - 18 °С).
Пробы цельной крови, должны храниться при температуре от 1 до 4 °С.
Пробы биологического материала, помещенные в прочную пластиковую или стеклянную посуду, герметически закупоренную, должны быть обработаны дезинфицирующим раствором, опечатаны и с сопроводительными документами (обоснование проводимых исследований, данные анамнеза), данные завоза скота (импортных животных), условия содержания, наличие клинических признаков инфекции с соблюдением температурного режима, направлены в лабораторию с нарочным.
При проведении лабораторной диагностики вируса болезни Шмалленберга проводят:
- выявление генома вируса болезни Шмалленберга методом полимеразной цепной реакции с этапом обратной транскрипции с детекцией продуктов амплификации в режиме реального времени (ОТ-ПЦР);
- вирусовыделение;
- выявление антигена и (или) антител к возбудителю болезни Шмалленберга методом иммуноферментного анализа (ИФА) и другими сертифицированными диагностическими тест-системами.
Для постановки диагноза на болезнь Шмалленберга необходимо лабораторное подтверждение наличия вируса в организме животного методами выявления вирусного генома или вируса.
Обнаружение антител к возбудителю болезни Шмалленберга в сыворотке крови животного свидетельствует о контакте животного с вирусом Шмалленберга в период, предшествовавший отбору проб сыворотки крови и является ретроспективной диагностикой, увеличение титра антител или образование антител у ранее серонегативных животных (при отсутствии вакцинации) может свидетельствовать о циркуляции вируса в стаде.
При проведение дифференциальной диагностики болезни Шмалленберга исключают блютанг, вирусную диарею КРС, инфекционный ринотрахеит (ИРТ), эфемерную лихорадку.
Полезные ссылки
